ਓਇਸਟਰ ਮਸ਼ਰੂਮ ਲੈਕੇਸ ਐਨਆਰਸੀ 620 ਦਾ ਉਤਪਾਦਨ ਅਤੇ ਬਾਇਓਕੈਮੀਕਲ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਵਿੱਚ ਇਸਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ।

28°C 'ਤੇ 25 ਦਿਨਾਂ ਦੇ ਸਥਿਰ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, *Pleurotus ostreatus* NRC620 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਨੇ ਫੰਗਲ ਕਲਚਰ ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਿਖਾਈ। ਇਸ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ pH ਅਤੇ ਤਾਪਮਾਨ ਮੁੱਲ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 3.0 ਅਤੇ 70°C ਸਨ। 40°C ਅਤੇ 50°C 'ਤੇ 2 ਘੰਟੇ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 68.33% ਅਤੇ 59.61% ਬਰਕਰਾਰ ਰਹੀ। ਸਿਟਰੇਟ-ਫਾਸਫੇਟ ਬਫਰ (pH 7.0) ਵਿੱਚ 2 ਘੰਟੇ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ 100% 'ਤੇ ਰਹੀ। 10 mM MgSO₄ ਅਤੇ CuSO₄ ਦੇ ਜੋੜ ਨਾਲ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਲਗਭਗ 21% ਅਤੇ 35% ਦਾ ਵਾਧਾ ਹੋਇਆ, ਜਦੋਂ ਕਿ NaCl, MnCl₂, KCl, ਅਤੇ CaCl₂ ਨੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਰੋਕਿਆ। ABTS ਨੂੰ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤਦੇ ਹੋਏ, *Pleurotus ostreatus* NRC 620 laccase ਦੇ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਮਾਪਦੰਡ (Km ਅਤੇ Vmax) ਕ੍ਰਮਵਾਰ 1.99 mM ਅਤੇ 16,217 μmol min−1 L−1 ਸਨ। ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਇਲਾਜ ਨੇ pH ਅਤੇ ਲੇਸ ਦੋਵਾਂ ਨੂੰ ਕਾਫ਼ੀ ਘਟਾ ਦਿੱਤਾ, ਅਤੇ ਇਹ ਕਮੀ ਸਟੋਰੇਜ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ ਵਾਧੇ ਨਾਲ ਸੰਬੰਧਿਤ ਹੈ। ਲੈੱਕਸ ਇਲਾਜ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੀ ਕੁੱਲ ਫੀਨੋਲਿਕ ਸਮੱਗਰੀ ਵਿੱਚ ਥੋੜ੍ਹੀ ਜਿਹੀ ਕਮੀ ਆਈ, ਪਰ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਕਮੀ ਨਹੀਂ ਦੇਖੀ ਗਈ।
ਹਾਲ ਹੀ ਦੇ ਸਾਲਾਂ ਵਿੱਚ, ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਨੇ ਭੋਜਨ ਉਦਯੋਗ ਵਿੱਚ ਹਰੀ ਬਾਇਓਟੈਕਨਾਲੌਜੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ 'ਤੇ ਧਿਆਨ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ ਹੈ। ਲੈਕੇਸ ਭੋਜਨ ਉਦਯੋਗ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਲਾਭਦਾਇਕ ਐਨਜ਼ਾਈਮਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਹੈ, ਜੋ ਜੂਸ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ, ਬੇਕਿੰਗ, ਵਾਈਨ ਸਥਿਰੀਕਰਨ, ਅਤੇ ਭੋਜਨ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਆਰਗੈਨੋਲੇਪਟਿਕ ਗੁਣਾਂ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਬਣਾਉਣ ਵਰਗੇ ਖੇਤਰਾਂ ਵਿੱਚ ਉਪਯੋਗ ਲੱਭਦਾ ਹੈ।¹ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਉੱਚ ਪੌਦੇ ਅਤੇ ਸੂਖਮ ਜੀਵ ਲੈਕੇਸ ਛੁਪਾਉਂਦੇ ਹਨ,²ਅਤੇ ਡਿਊਟਰੋਮਾਈਸੀਟਸ, ਐਸਕੋਮਾਈਸੀਟਸ, ਅਤੇ ਬੇਸੀਡੀਓਮਾਈਸੀਟਸ ਵਰਗੀਆਂ ਫੰਜਾਈ ਵੀ ਲੈਕੇਸ ਪੈਦਾ ਕਰ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ।³ਲੈਕੇਸ (EC 1.10.3.2) ਇੱਕ ਨੀਲਾ ਆਕਸੀਡੇਸ ਹੈ ਜੋ ਤਿੰਨ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਤਾਂਬੇ ਦੇ ਪਰਮਾਣੂਆਂ ਵਾਲੇ ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਅਣੂ ਆਕਸੀਜਨ ਨੂੰ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਅਤੇ ਖੁਸ਼ਬੂਦਾਰ ਅਮੀਨਾਂ ਦਾ ਆਕਸੀਕਰਨ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਫਲਾਂ ਅਤੇ ਸਬਜ਼ੀਆਂ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਉਤਪਾਦਨ ਦੌਰਾਨ, ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਅਤੇ ਗੈਰ-ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਭੂਰਾ ਹੋਣਾ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਮੁੱਦੇ ਹਨ।⁴ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ ਪਦਾਰਥ ਜੂਸ ਦੇ ਰੰਗ, ਸੁਆਦ ਅਤੇ ਖੁਸ਼ਬੂ ਨੂੰ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਇਸ ਲਈ ਇਹਨਾਂ ਨੂੰ ਹਟਾ ਦੇਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।⁵
ਸਾਰੇ ਫਲਾਂ ਵਿੱਚੋਂ, ਸੇਬ ਦੁਨੀਆ ਭਰ ਵਿੱਚ ਅਤੇ ਯੂਰਪੀਅਨ ਯੂਨੀਅਨ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਖਪਤ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। 2019 ਵਿੱਚ, ਸੇਬ ਦਾ ਉਤਪਾਦਨ 87 ਮਿਲੀਅਨ ਟਨ ਤੋਂ ਵੱਧ, ਵਿਸ਼ਵ ਪੱਧਰ 'ਤੇ ਤੀਜੇ ਸਥਾਨ 'ਤੇ ਸੀ।⁶ਸੇਬਾਂ ਵਿੱਚ ਕਈ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦੇ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਫਲੇਵੋਨੋਇਡ ਅਤੇ ਫੀਨੋਲਿਕ ਐਸਿਡ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਕੈਫੀਕ ਐਸਿਡ ਅਤੇ ਕਲੋਰੋਜੈਨਿਕ ਐਸਿਡ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।⁷ਕਿਉਂਕਿ ਸੇਬ ਦਾ ਜੂਸ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇਸਦੇ ਸਪੱਸ਼ਟ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਪੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੌਰਾਨ ਲਗਭਗ 50% ਤੋਂ 90% ਫੀਨੋਲਿਕ ਹਿੱਸੇ ਖਤਮ ਹੋ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।⁸ਅੱਜ, ਖਪਤਕਾਰ ਘੱਟ ਤੋਂ ਘੱਟ ਪ੍ਰੋਸੈਸ ਕੀਤੇ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੀ ਚੋਣ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਉੱਚ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਸਮੱਗਰੀ ਵਾਲੇ ਬੱਦਲਵਾਈ ਸੇਬ ਦਾ ਜੂਸ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਇਸਦੀ ਉੱਚ ਫੀਨੋਲਿਕ ਸਮੱਗਰੀ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਇਸ ਕਿਸਮ ਦਾ ਸੇਬ ਦਾ ਜੂਸ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਰੰਗੀਨ ਹੋਣ ਅਤੇ ਕਾਲੇ ਹੋਣ ਲਈ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।⁹ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਕਾਲੇਪਨ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਜਾਂ ਰੋਕਣ ਲਈ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਤਕਨੀਕਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ 60-90°C 'ਤੇ ਪਾਸਚੁਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਵਰਗੀਆਂ ਗਰਮੀ ਦੇ ਇਲਾਜ ਦੇ ਤਰੀਕੇ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।¹⁰ਹਾਲਾਂਕਿ, Sauceda-Gálvez ਦੁਆਰਾ ਖੋਜ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ¹¹, ਥਰਮਲ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਅਸਥਿਰ ਰਸਾਇਣਾਂ ਨੂੰ ਨਸ਼ਟ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਆਰਗੈਨੋਲੇਪਟਿਕ ਗੁਣਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਥਰਮਲ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੇ ਵਿਕਲਪਾਂ ਵਿੱਚ ਸੁਪਰਕ੍ਰਿਟੀਕਲ ਕਾਰਬਨ ਡਾਈਆਕਸਾਈਡ, ਅਲਟਰਾਵਾਇਲਟ ਰੇਡੀਏਸ਼ਨ, ਅਲਟਰਾਸਾਊਂਡ, ਉੱਚ ਹਾਈਡ੍ਰੋਸਟੈਟਿਕ ਦਬਾਅ, ਜਾਂ ਉੱਚ-ਦਬਾਅ ਸਮਰੂਪੀਕਰਨ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।¹²ਇਹਨਾਂ ਤਕਨੀਕਾਂ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਅਤੇ ਢੁਕਵੇਂ ਫਲਾਂ ਦੇ ਜੂਸ ਦੀ ਪੈਦਾਵਾਰ ਵਰਤੇ ਗਏ ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਅਤੇ ਉਤਪਾਦ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਇਹਨਾਂ ਦੀ ਵਿਆਪਕ ਵਰਤੋਂ ਉੱਚ ਲਾਗਤਾਂ, ਕੁਝ ਭੋਜਨ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ 'ਤੇ ਮਾੜੇ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ, ਜਾਂ ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਅਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲਤਾ ਦੁਆਰਾ ਸੀਮਤ ਹੈ।^13,14
ਫਲਾਂ ਦੇ ਰਸ ਨੂੰ ਸਥਿਰ ਕਰਨ ਅਤੇ ਸਪਸ਼ਟ ਕਰਨ ਲਈ ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।¹⁵ਗੋਕਮੈਨ ਅਤੇ ਹੋਰ।¹⁶ਫਲਾਂ ਦੇ ਜੂਸ ਦੀ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਲਈ ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ ਪੋਲੀਮਰ ਜਾਂ ਓਲੀਗੋਮਰ ਵਿੱਚ ਬਦਲ ਕੇ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਹਟਾਉਂਦਾ ਹੈ ਜੋ ਕਿਸੇ ਵੀ ਅਲਟਰਾਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਝਿੱਲੀ ਦੁਆਰਾ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਹਟਾਏ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਸੇਬ ਦਾ ਜੂਸ 50°C 'ਤੇ ਛੇ ਹਫ਼ਤਿਆਂ ਤੱਕ ਸਥਿਰ ਰੰਗ ਅਤੇ ਸਪਸ਼ਟਤਾ ਬਣਾਈ ਰੱਖ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਸ਼ੁੱਧ *ਟ੍ਰਾਈਕੋਡਰਮਾ* ਲੈਕੇਸ ਨੂੰ ਐਲੂਮਿਨਾ ਮਣਕਿਆਂ 'ਤੇ ਸਥਿਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਬਾਇਲ ਦੂਸ਼ਿਤ ਹੋਣ ਕਾਰਨ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਆਫ-ਫਲੇਵਰ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ ਚੋਣਵੇਂ ਤੌਰ 'ਤੇ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।¹⁷
ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਲਗਭਗ 80-90% ਅਸਥਿਰ ਹਿੱਸੇ ਐਸਟਰ ਅਤੇ ਐਲਡੀਹਾਈਡ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਜੂਸ ਨੂੰ ਇੱਕ ਵਿਲੱਖਣ ਖੁਸ਼ਬੂ ਦਿੰਦੇ ਹਨ।¹⁸ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਨੂੰ ਸਪੱਸ਼ਟ ਕਰਨ ਲਈ *ਟ੍ਰੈਮੇਟਸ ਵਰਸੀਕਲਰ* ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਨੂੰ ਨਾਰੀਅਲ ਦੇ ਛੋਟੇ ਛਿਲਕਿਆਂ ਤੋਂ ਕੁਦਰਤੀ ਰੇਸ਼ੇ ਤੋਂ ਬਣੇ ਇੱਕ ਸਸਤੇ ਸਹਾਰੇ 'ਤੇ ਸਥਿਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।¹⁹ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਐਂਜ਼ਾਈਮ-ਮੁਕਤ ਜਾਂ ਸਥਿਰਤਾ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ, ਜਾਂ ਅਲਟਰਾਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਦੇ ਨਾਲ ਮਿਲ ਕੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਸਥਿਰੀਕਰਨ (ਰੰਗ ਅਤੇ ਗੰਦਗੀ) ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਹੈ।^5,19ਹਾਲਾਂਕਿ, ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਭੌਤਿਕ-ਰਸਾਇਣਕ ਗੁਣਾਂ 'ਤੇ ਫੰਗਲ ਲੈਕੇਸ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ ਅਜੇ ਵੀ ਅਸਪਸ਼ਟ ਹੈ। ਇਸ ਲਈ, ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਦਾ ਉਦੇਸ਼ ਫੰਗਲ ਲੈਕੇਸ ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਅਤੇ ਦੋ-ਹਫ਼ਤੇ ਦੇ ਰੈਫ੍ਰਿਜਰੇਟਿਡ ਸਟੋਰੇਜ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਭੌਤਿਕ-ਰਸਾਇਣਕ ਗੁਣਾਂ, ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਸਮੱਗਰੀ ਅਤੇ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਬਦਲਾਵਾਂ ਦੀ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜਾਂਚ ਕਰਨਾ ਸੀ। ਲੈਕੇਸ ਵਿੱਚ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ ਆਕਸੀਡਾਈਜ਼ ਕਰਨ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਜੂਸ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਸਮੇਤ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਉਦਯੋਗਿਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਵਾਅਦਾ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਨੇ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ, ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਲਈ ਆਦਰਸ਼ ਸਥਿਤੀਆਂ ਅਤੇ ਜੂਸ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ੀਲਤਾ 'ਤੇ ਕੇਂਦ੍ਰਤ ਕੀਤਾ। ਜਦੋਂ ਕਿ ਓਇਸਟਰ ਮਸ਼ਰੂਮਜ਼ (P. ostreatus NRC 620) 'ਤੇ ਖੋਜ ਅਜੇ ਵੀ ਸੀਮਤ ਹੈ, ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਫੰਗਲ ਸਰੋਤਾਂ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਟ੍ਰਾਮੇਟਸ ਵਰਸੀਕਲਰ ਅਤੇ ਗੈਨੋਡਰਮਾ ਲੂਸੀਡਮ ਤੋਂ ਐਨਜ਼ਾਈਮਾਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਹੈ। ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਦਾ ਉਦੇਸ਼ ਭੋਜਨ ਉਦਯੋਗ ਵਿੱਚ ਇਸ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੇ ਸੰਭਾਵੀ ਉਪਯੋਗ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨਾ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਵਿਲੱਖਣ ਗੁਣਾਂ, ਖਾਸ ਕਰਕੇ ਇਸਦੇ ਆਦਰਸ਼ pH ਅਤੇ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਉਜਾਗਰ ਕਰਨਾ ਸੀ।
2,2′-Azooxybis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) ਸਿਗਮਾ-ਐਲਡਰਿਕ (ਕੈਨੇਡਾ) ਤੋਂ ਖਰੀਦਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਬਾਕੀ ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣਾਤਮਕ ਗ੍ਰੇਡ ਦੇ ਸਨ।
ਨੈਸ਼ਨਲ ਰਿਸਰਚ ਸੈਂਟਰ ਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਬਾਇਲ ਕਲਚਰ ਕਲੈਕਸ਼ਨ ਸੈਂਟਰ ਨੇ ਜਾਣਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਓਇਸਟਰ ਮਸ਼ਰੂਮ ਸਟ੍ਰੇਨ NRC620 ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ। ਸਬਕਲਚਰ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਇਸ ਸਟ੍ਰੇਨ ਨੂੰ ਆਲੂ ਡੈਕਸਟ੍ਰੋਜ਼ ਐਗਰ ਸਲੈਂਟਸ 'ਤੇ 4°C 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਟੀਕਾਕਰਨ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਦਾ ਤਰੀਕਾ ਇਸ ਪ੍ਰਕਾਰ ਸੀ: 10-ਦਿਨ ਪੁਰਾਣਾ, ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵਿਕਸਤ ਮਾਈਸੀਲੀਅਮ ਆਲੂ ਡੈਕਸਟ੍ਰੋਜ਼ ਐਗਰ ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਟੀਕਾ ਲਗਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ 28°C 'ਤੇ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। 10 ਦਿਨਾਂ ਬਾਅਦ, ਤਿੰਨ 12-ਮਿਲੀਮੀਟਰ-ਵਿਆਸ ਮਾਈਸੀਲੀਅਲ ਬਲਾਕਾਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਨਿਰਜੀਵ ਧਾਤ ਪੰਚ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਅਗਰ ਮੀਡੀਆ ਤੋਂ ਹਟਾ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ 250-ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਏਰਲੇਨਮੇਅਰ ਫਲਾਸਕ ਵਿੱਚ 50 ਮਿ.ਲੀ. ਨਿਰਜੀਵ ਕਲਚਰ ਮਾਧਿਅਮ ਵਾਲੇ ਸੂਤੀ ਪਲੱਗਾਂ ਨਾਲ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ (pH 5.0, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪਹਿਲਾਂ ਓਥਮੈਨ ਐਟ ਅਲ ਦੁਆਰਾ ਦੱਸਿਆ ਗਿਆ ਹੈ)।²⁰). ਕਲਚਰ ਨੂੰ 18 ਦਿਨਾਂ ਲਈ 28°C 'ਤੇ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਫਿਰ ਕਲਚਰ ਨੂੰ ਵੌਟਮੈਨ ਨੰਬਰ 1 ਫਿਲਟਰ ਪੇਪਰ ਰਾਹੀਂ ਫਿਲਟਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਅਤੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਸਰੋਤ ਵਜੋਂ ਕੰਮ ਕਰਦਾ ਸੀ।
ਲੈਕੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ABTS ਨੂੰ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤ ਕੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਮਿਸ਼ਰਣ (2 mL) ਵਿੱਚ 0.3 mM ABTS (0.1 M ਸੋਡੀਅਮ ਸਾਇਟਰੇਟ ਬਫਰ, pH 4.5 ਵਿੱਚ ਘੁਲਿਆ ਹੋਇਆ) ਦਾ 500 μL ਅਤੇ ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਪਤਲਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨਮੂਨਾ ਸ਼ਾਮਲ ਸੀ।^21,22ਇਹ ਧਿਆਨ ਵਿੱਚ ਰੱਖਦੇ ਹੋਏ ਕਿ ਲੈਕੇਸ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (28 °C ± 2) 'ਤੇ ABTS ਨੂੰ ਆਕਸੀਕਰਨ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ, ABTS ਆਕਸੀਕਰਨ 420 nm (ε) 'ਤੇ ਸੋਖਣ ਵਿੱਚ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਮਾਪ ਕੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।₄₂₀= 36,000 ਸੈ.ਮੀ.^-1 M ^-1) ਇੱਕ ਐਜਿਲੈਂਟ ਕੈਰੀ-100 ਯੂਵੀ ਸਪੈਕਟਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ। 1 μmol ABTS ਪ੍ਰਤੀ ਮਿੰਟ ਆਕਸੀਕਰਨ ਲਈ ਲੈਕੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੀ ਇੱਕ ਇਕਾਈ ਦੀ ਲੋੜ ਸੀ। ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਬ੍ਰੈਡਫੋਰਡ ਵਿਧੀ ਦੁਆਰਾ ਬੋਵਾਈਨ ਸੀਰਮ ਐਲਬਿਊਮਿਨ ਨੂੰ ਅੰਦਰੂਨੀ ਨਿਯੰਤਰਣ ਵਜੋਂ ਵਰਤ ਕੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।^23,24
ਓਇਸਟਰ ਮਸ਼ਰੂਮ ਸਟ੍ਰੇਨ NRC 620 ਤੋਂ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਇਸਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ 28 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਸਥਿਰ ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ 25 ਦਿਨਾਂ ਲਈ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਕਾਸ਼ਤ ਅੰਤਰਾਲਾਂ 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ।
ਲੈਕੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ ਤਾਪਮਾਨ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਲਈ, 20 ਤੋਂ 90 °C ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਸੀਮਾ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਯੋਗ ਕੀਤੇ ਗਏ। ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਸ਼ੁਰੂ ਕਰਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, ਬਫਰ (0.1 M ਸੋਡੀਅਮ ਸਾਇਟਰੇਟ, pH 4.5) ਅਤੇ ਸਬਸਟਰੇਟ (ABTS) ਨੂੰ ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਤਾਪਮਾਨਾਂ 'ਤੇ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਥਰਮਲ ਸਥਿਰਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ 0.05 M ਸੋਡੀਅਮ ਫਾਸਫੇਟ ਬਫਰ (pH 7.0) ਵਿੱਚ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 40, 50, 60, ਅਤੇ 70 °C 'ਤੇ 2 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕਰਕੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਫਿਰ ABTS ਸਬਸਟਰੇਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਬਾਕੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਲੈਕੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ pH ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ 0.1 M ਸਿਟਰੇਟ-ਫਾਸਫੇਟ ਬਫਰਾਂ ਵਿੱਚ 2.5 ਤੋਂ 7.0 ਦੀ pH ਰੇਂਜ ਵਾਲੇ ABTS ਨੂੰ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤ ਕੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। pH ਸਥਿਰਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਘੋਲ ਨੂੰ 0.1 M ਸਿਟਰੇਟ ਅਤੇ ਟ੍ਰਿਸ ਬਫਰਾਂ (pH 3, 4, 6, ਅਤੇ 7) ਵਿੱਚ ਦੋ ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ 40°C 'ਤੇ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਜੋਂ ABTS ਨਾਲ ਬਾਕੀ ਰਹਿੰਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੀ ਗਣਨਾ ਕੀਤੀ ਗਈ।
ਲੈਕੇਸ ਨੂੰ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ ਸੋਡੀਅਮ ਫਾਸਫੇਟ ਬਫਰ (0.05 M, pH 7.0) ਵਿੱਚ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਧਾਤੂ ਆਇਨਾਂ (Mg2+, Cu2+, Co2+, Ca2+, Zn2+, K+, Na+, ਅਤੇ Mn2+) ਵਾਲੇ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 2.5 mM ਅਤੇ 10 mM ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਫਿਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਸ਼ੁਰੂ ਕਰਨ ਲਈ ਸਬਸਟਰੇਟ (ABTS) ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਸੰਬੰਧਿਤ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਗਤੀ ਮਾਪਦੰਡਾਂ (Vmax ਅਤੇ Km) ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (0.025–3 mM) 'ਤੇ ਲੈਕੇਸ ਦੁਆਰਾ ABTS ਆਕਸੀਕਰਨ ਨੂੰ pH 4.5 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਗਤੀ^{ਸਥਿਰ ਅੰਕ}ਮਾਈਕਲਿਸ-ਮੈਂਟੇਨ ਸਮੀਕਰਨ ਦੇ ਅੰਕਾਂ ਦੀ ਗਣਨਾ ਲਾਈਨਵੀਵਰ-ਬਰਕ ਪਲਾਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਜੋ ਸਬਸਟਰੇਟ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਇੱਕ ਫੰਕਸ਼ਨ ਵਜੋਂ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਰ ਦੇ ਪਰਸਪਰ ਨੂੰ ਪਲਾਟ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਸਥਿਰਾਂਕਾਂ ਦੀ ਗਣਨਾ ਗ੍ਰਾਫਪੈਡ ਪ੍ਰਿਜ਼ਮ ਸੰਸਕਰਣ 6.01 ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਲਾਈਨਵੀਵਰ-ਬਰਕ ਪਲਾਟ ਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।
ਸੇਬਾਂ ਨੂੰ ਟੂਟੀ ਦੇ ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਧੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਉਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਅੱਧੇ ਵਿੱਚ ਕੱਟਿਆ ਗਿਆ ਅਤੇ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਆਟੋਮੈਟਿਕ ਬ੍ਰੌਨ MP80 ਐਪਲ ਜੂਸਰ (ਜਰਮਨੀ ਵਿੱਚ ਬਣਿਆ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਜੂਸ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ। ਜੂਸ ਨੂੰ ਪਨੀਰ ਦੇ ਕੱਪੜੇ ਦੀਆਂ ਚਾਰ ਪਰਤਾਂ ਰਾਹੀਂ ਫਿਲਟਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਕੰਟਰੋਲ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨਹੀਂ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ, ਜਦੋਂ ਕਿ 2.0% ਲੈਕੇਸ (ਸਭ ਤੋਂ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ) ਤਾਜ਼ੇ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੀ ਗਈ, ਜਿਸਨੂੰ ਫਿਰ ਦੋ ਹਫ਼ਤਿਆਂ ਲਈ 4°C 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।
ਟਾਈਟਰੇਟੇਬਲ ਐਸਿਡਿਟੀ (TA) ਅਤੇ pH ਬੋਲਟਨ ਐਟ ਦੇ ਢੰਗ ਅਨੁਸਾਰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।^ਅਲ.27. ਹਰੇਕ ਨਮੂਨੇ ਦਾ pH ਇੱਕ ਡਿਜੀਟਲ pH ਮੀਟਰ (JENWAY 3510 pH ਮੀਟਰ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਟਾਈਟਰੇਟੇਬਲ ਐਸਿਡਿਟੀ (TA) ਦੀ ਗਣਨਾ ਹੇਠ ਦਿੱਤੇ ਫਾਰਮੂਲੇ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਲਿਕ ਐਸਿਡ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।
ਜਿੱਥੇ V ਅਤੇ C ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਟਾਈਟਰੇਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਵਰਤੇ ਗਏ ਸੋਡੀਅਮ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸਾਈਡ ਘੋਲ ਦਾ ਆਇਤਨ (mL) ਅਤੇ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (0.1 mol/L) ਹਨ। K ਮਲਿਕ ਐਸਿਡ ਪਰਿਵਰਤਨ ਗੁਣਾਂਕ ਹੈ, ਜੋ 0.067 ਦੇ ਬਰਾਬਰ ਹੈ, ਅਤੇ W ਸੇਬ ਦੇ ਰਸ ਦਾ ਪੁੰਜ (g) ਹੈ।
ਕੁੱਲ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਠੋਸ ਪਦਾਰਥ (^{ਟੀਡੀਐਸ}) ਸਾਰੇ ਜੂਸ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਸਮੱਗਰੀ ਨੂੰ PAL-1 ਪਾਕੇਟ ਰਿਫ੍ਰੈਕਟੋਮੀਟਰ (ATAGO, ਟੋਕੀਓ, ਜਾਪਾਨ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਹਰੇਕ ਮਾਪ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਆਪਟੀਕਲ ਲੈਂਸ ਨੂੰ ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਧੋਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਹਰੇਕ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਤਿੰਨ ਵਾਰ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਹਰੇਕ ਨਮੂਨੇ ਲਈ ਮੁੱਲ ਦੀ ਗਣਨਾ ਤਿੰਨ ਮਾਪਾਂ ਦੀ ਔਸਤ ਨਾਲ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਹਰੇਕ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਲਈ ਔਸਤ ± ਮਿਆਰੀ ਭਟਕਣ ਦੀ ਵੀ ਗਣਨਾ ਇਹਨਾਂ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਔਸਤ ਨਾਲ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।
ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਵਿਸਕੋਇਲਾਸਟਿਕਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਇੱਕ ਰੋਟੇਸ਼ਨਲ ਵਿਸਕੋਮੀਟਰ (RV, ਰੀਓਟੈਸਟ 2, ਜਰਮਨੀ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਨਮੂਨਾ ਵਿਸਕੋਮੀਟਰ ਦੇ "S2" ਸਿਲੰਡਰ ਦੇ ਅੰਦਰ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਸਪੱਸ਼ਟ ਲੇਸਦਾਰਤਾ ਨੂੰ ਸ਼ੀਅਰ ਤਣਾਅ ਬਨਾਮ ਸ਼ੀਅਰ ਰੇਟ ਵਕਰ ਦੀ ਢਲਾਣ ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਜਿਸਦੀ ਗਣਨਾ ਸ਼ੀਅਰ ਤਣਾਅ ਅਤੇ ਸੰਬੰਧਿਤ ਵਕਰਾਂ ਤੋਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸ਼ੀਅਰ ਦਰਾਂ (1.00 ਤੋਂ 437.4 s⁻¹ ਤੱਕ) 'ਤੇ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਸਪੱਸ਼ਟ ਲੇਸਦਾਰਤਾ ਦੀ ਗਣਨਾ ਕਰਨ ਲਈ ਫਾਰਮੂਲਾ ਇਸ ਪ੍ਰਕਾਰ ਹੈ:
ਜਿੱਥੇ η ਸਪੱਸ਼ਟ ਲੇਸ (cP) ਹੈ, τ ਸ਼ੀਅਰ ਸਟ੍ਰੈੱਸ (dyn/cm²) ਹੈ, γ ਸ਼ੀਅਰ ਰੇਟ (sec⁻¹) ਹੈ, ਅਤੇ (τ) ਦੀ ਗਣਨਾ ਟਾਰਕ (α) ਅਤੇ ਸਿਲੰਡਰ (Z) ਮੁੱਲਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਹੇਠ ਦਿੱਤੇ ਫਾਰਮੂਲੇ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ: τ = Z . α।
ਭੂਰਾ ਸੂਚਕਾਂਕ ਮੀਡਾਵ ਏਟ ਦੇ ਢੰਗ ਅਨੁਸਾਰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।^ਅਲ.29. 10-ਮਿ.ਲੀ. ਜੂਸ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ 2750 xg 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। 5 ਮਿ.ਲੀ. ਜੂਸ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਨੂੰ 5 ਮਿ.ਲੀ. 95% ਈਥੇਨੌਲ ਨਾਲ ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ। ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੀ ਸੋਖਣ ਸ਼ਕਤੀ ਨੂੰ ਸ਼ਿਮਾਡਜ਼ੂ ਯੂਵੀ ਸਪੈਕਟਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ (ਯੂਵੀ-1601 ਪੀਸੀ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ 420 ਐਨਐਮ 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ।
ਬੋਲਟਨ ਅਤੇ ਹੋਰਾਂ ਦੁਆਰਾ ਦੱਸੇ ਗਏ ਫੋਲਿਨ-ਸਿਓਕਾਲਟੇਯੂ ਰੀਐਜੈਂਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੁੱਲ ਫੀਨੋਲਿਕ ਸਮੱਗਰੀ (ਟੀਪੀਸੀ) ਨੂੰ ਰੰਗ-ਮਿਤੀ ਅਨੁਸਾਰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।^[27]]. 0 ਤੋਂ 500 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ/ਲੀਟਰ ਤੱਕ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਲਈ ਗੈਲਿਕ ਐਸਿਡ ਦਾ ਇੱਕ ਮਿਆਰੀ ਵਕਰ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ (^r²= 0.997)। ਨਤੀਜੇ ਗੈਲਿਕ ਐਸਿਡ ਦੇ ਸਮਾਨ (mg GAE/mL) ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਹਨ।
25 μL ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਵਿੱਚ 125 μL ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ ਅਤੇ 2850 μL FRAP ਘੋਲ ਪਾਓ ਅਤੇ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਹਨੇਰੇ ਵਿੱਚ ਛੱਡ ਦਿਓ।³⁰ਘੱਟੋ-ਘੱਟ। ਫਿਰ ਸ਼ਿਮਾਡਜ਼ੂ ਯੂਵੀ ਸਪੈਕਟਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ (UV-1601 PC) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ 593 nm 'ਤੇ ਸੋਖਣ ਨੂੰ ਮਾਪੋ। FRAP ਰੀਐਜੈਂਟ 300 mM ਐਸੀਟੇਟ ਬਫਰ (pH 3.6), 20 mM ਆਇਰਨ (III) ਕਲੋਰਾਈਡ, ਅਤੇ 10 mM 2,4,6-ਟ੍ਰਿਸ (2-ਪਾਈਰੀਡਾਈਲ) ਟ੍ਰਾਈਜ਼ੀਨ (TPTZ) (40 mM HCl ਵਿੱਚ ਘੁਲਿਆ ਹੋਇਆ) ਨੂੰ 10:1:1 ਦੇ ਅਨੁਪਾਤ ਵਿੱਚ ਮਿਲਾ ਕੇ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਟ੍ਰੋਲੌਕਸ ਨੂੰ ਸਟੈਂਡਰਡ ਵਜੋਂ ਵਰਤ ਕੇ ਇੱਕ ਸਟੈਂਡਰਡ ਕਰਵ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ (^ਆਰ²= 0.999), ਅਤੇ ਨਤੀਜੇ μM ਟ੍ਰੋਲੌਕਸ/mL ਵਜੋਂ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਹਨ।
ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਅਤੇ ਇਲਾਜ ਨਾ ਕੀਤੇ ਜੂਸਾਂ ਦੀ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ DPPH ਵਿਧੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਤਾਂ ਜੋ DPPH ਮੁਕਤ ਰੈਡੀਕਲਸ ਨੂੰ ਖਤਮ ਕਰਨ ਦੀ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੀ ਯੋਗਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕੇ।³¹ਦਸ ਮਾਈਕ੍ਰੋਲੀਟਰ ਜੂਸ ਨੂੰ 1 ਮਿਲੀਲੀਟਰ DPPH ਘੋਲ (100 μM) ਮੀਥੇਨੌਲ ਵਿੱਚ ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। 30 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਹਨੇਰੇ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੀ ਸੋਖਣ ਸ਼ਕਤੀ ਨੂੰ ਸ਼ਿਮਾਡਜ਼ੂ UV ਸਪੈਕਟਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ (UV-1601 PC) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ 517 nm 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ। ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਕਰਵ (_^R2= 0.990)।
ਪ੍ਰਾਪਤ ਅੰਕੜਿਆਂ ਤੋਂ ਪਤਾ ਚੱਲਿਆ ਕਿ ਫਰਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਦੇ 18ਵੇਂ ਦਿਨ ਦੇ ਅੰਤ ਤੱਕ NRC 620 ਓਇਸਟਰ ਮਸ਼ਰੂਮਜ਼ ਵਿੱਚ ਵੱਧ ਤੋਂ ਵੱਧ ਲੈਕੇਸ ਉਤਪਾਦਨ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ, ਜੋ 1302 U/L ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਤੱਕ ਪਹੁੰਚ ਗਿਆ। ਇਹ ਲੈਕੇਸ ਉਤਪਾਦਨ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ ਕਾਸ਼ਤ ਸਮੇਂ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਦੇ ਆਧਾਰ ਵਜੋਂ ਕੰਮ ਕਰਦਾ ਸੀ (ਚਿੱਤਰ 1)। ਹਾਲਾਂਕਿ ਵਧਦੀ ਕਾਸ਼ਤ ਦੇ ਸਮੇਂ ਦੇ ਨਾਲ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਉਤਪਾਦਨ ਵਧਿਆ, ਵਾਧੇ ਦੀ ਦਰ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਕਾਸ਼ਤ ਦੇ ਸਮੇਂ ਦੇ ਅਨੁਪਾਤੀ ਨਹੀਂ ਸੀ; 21 ਦਿਨਾਂ ਬਾਅਦ, ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਸਿਰਫ 90 U/L (1390 U/L) ਤੱਕ ਵਧੀ ਸੀ। ਇਸ ਲਈ, ਵਧੇ ਹੋਏ ਕਾਸ਼ਤ ਸਮੇਂ ਦੇ ਆਰਥਿਕ ਲਾਭਾਂ ਨਾਲ ਉਤਪਾਦ ਉਪਜ ਨੂੰ ਸੰਤੁਲਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਅੰਤ ਵਿੱਚ 18 ਦਿਨਾਂ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਕਾਸ਼ਤ ਸਮੇਂ ਵਜੋਂ ਚੁਣਿਆ ਗਿਆ।
ਪਲੀਰੋਟਸ ਓਸਟ੍ਰੀਟਸ ਐਨਆਰਸੀ 620 ਵਿੱਚ ਲੈਕੇਸ ਉਪਜ 'ਤੇ ਕਾਸ਼ਤ ਦੇ ਸਮੇਂ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ। ਤਿੰਨ (12 ਮਿਲੀਮੀਟਰ) ਫੰਗਲ ਮਾਈਸੀਲੀਅਲ ਬਲਾਕਾਂ ਨੂੰ 50 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਨਿਰਜੀਵ ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ ਟੀਕਾ ਲਗਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਫਿਰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸਮੇਂ ਲਈ 28 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਸੰਸਕ੍ਰਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਹੋਰ ਅਧਿਐਨਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਸਾਡੇ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਫੰਜਾਈ ਦੁਆਰਾ ਲੈਕੇਸ ਦੇ સ્ત્રાવ ਦੀ ਸਿਖਰ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਆਦਰਸ਼ ਕਲਚਰ ਅਵਧੀ 7 ਤੋਂ 36 ਦਿਨਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਹੋਣ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਹੈ।³²ਏਜ਼ੀਕ ਅਤੇ ਹੋਰਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ।³³, *ਟ੍ਰੈਮੇਟਸ ਪੌਲੀਜ਼ੋਨਾ* WRF03 ਨੇ ਫਰਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਦੇ ਨੌਵੇਂ ਦਿਨ ਦੇ ਅੰਤ ਤੱਕ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਮਾਤਰਾ ਵਿੱਚ ਲੈਕੇਸ ਪੈਦਾ ਕੀਤਾ, ਜਿਸਦੀ ਇੱਕ ਖਾਸ ਗਤੀਵਿਧੀ 1637 U/mg ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸੀ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਓਥਮੈਨ ਅਤੇ ਹੋਰ।³⁴ਪਾਇਆ ਗਿਆ ਕਿ *ਟ੍ਰਾਈਕੋਡਰਮਾ ਹਰਜ਼ੀਅਨਮ* S7113 ਨੇ ਕਲਚਰ ਦੇ ਪੰਜਵੇਂ ਦਿਨ ਵੱਡੀ ਮਾਤਰਾ ਵਿੱਚ ਲੈਕੇਸ ਛੁਪਾਇਆ। ਲੈਕੇਸ ਉਤਪਾਦਨ ਦਰ ਚੌਦਵੇਂ ਦਿਨ ਇੱਕ ਸਿਖਰ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ ਪਹੁੰਚ ਗਈ ਅਤੇ ਫਿਰ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਘਟ ਗਈ।³⁴ਹਾਲਾਂਕਿ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦਾ સ્ત્રાવ ਮੁੱਖ ਵਿਕਾਸ ਪੜਾਅ ਦੌਰਾਨ ਵੀ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਇਹ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਿਚਕਾਰਲੇ ਪੜਾਅ ਦੌਰਾਨ ਸਿਖਰ 'ਤੇ ਪਹੁੰਚਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕਾਰਬਨ ਜਾਂ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਸਰੋਤ ਦੀ ਖਪਤ ਦੁਆਰਾ ਸ਼ੁਰੂ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।^34,35
ਹਾਲਾਂਕਿ ਪਲੀਰੋਟਸ ਓਸਟ੍ਰੀਟਸ ਐਨਆਰਸੀ 620 ਦੇ ਲੈਕੇਸ ਨੇ 50°C ਤੋਂ 80°C ਤੱਕ ਦੀ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ਾਲ ਤਾਪਮਾਨ ਸੀਮਾ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਗਤੀਵਿਧੀ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕੀਤੀ, ਸਿਖਰ ਗਤੀਵਿਧੀ (69–98%) ਦੇ ਨੇੜੇ, ਇਸਦੀ ਵੱਧ ਤੋਂ ਵੱਧ ਗਤੀਵਿਧੀ 70°C (ਚਿੱਤਰ 2a) 'ਤੇ ਦੇਖੀ ਗਈ। ਇਸ ਤਾਪਮਾਨ ਸੀਮਾ ਤੋਂ ਬਾਹਰ, ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਲਗਭਗ 70°C 'ਤੇ ਘੱਟ ਗਈ। ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੇ ਹਨ ਕਿ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨਾਂ 'ਤੇ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਸੰਭਾਵਤ ਤੌਰ 'ਤੇ ਕਿਉਂਕਿ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਗਤੀ ਊਰਜਾ ਨੂੰ ਵਧਾਉਂਦਾ ਹੈ।
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 ਵਿੱਚ ਲੈਕੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਤਾਪਮਾਨ (a) ਅਤੇ pH (b) ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ। 20 ਤੋਂ 90 °C ਤੱਕ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਜੋੜਨ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਸ਼ੁਰੂ ਕਰਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਤਾਪਮਾਨਾਂ 'ਤੇ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਪਹਿਲਾਂ ਤੋਂ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਲੈਕੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ pH ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ 2.5 ਤੋਂ 7.0 ਦੀ pH ਰੇਂਜ 'ਤੇ 0.1 M ਸਿਟਰੇਟ-ਫਾਸਫੇਟ ਬਫਰ ਵਾਲੇ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ABTS ਨੂੰ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤ ਕੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਏਜ਼ੀਕ ਅਤੇ ਹੋਰਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ^ਅਲ.33, *ਟ੍ਰੈਮੇਟਸ ਪੋਲੀਜ਼ੋਨਾ* WRF03 ਲੈਕੇਸ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ ਤਾਪਮਾਨ 55 °C ਹੈ, ਜੋ ਕਿ *ਗੈਨੋਡਰਮਾ ਲੂਸੀਡਮ* ਦੇ ਸਮਾਨ ਹੈ।^{ਲੈਕੇਸ36}ਅਤੇ *ਟ੍ਰੈਮੇਟਸ ਪੋਲੀਜ਼ੋਨਾ* KU-RNW02737 ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ ਤਾਪਮਾਨ (50 °C) ਦੇ ਸਮਾਨ^{ਲੈਕੇਸ} . ^{ਵੱਲੋਂ baldrian38}ਨੋਟ ਕਰਦਾ ਹੈ ਕਿ, ਹੋਰ ਲਿਗਨਿਨ-ਡਿਗਰੇਡਿੰਗ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ ਵਾਂਗ, ਲੈਕੇਸ ਲਈ ਆਦਰਸ਼ ਤਾਪਮਾਨ ਸੀਮਾ 50 ਅਤੇ 70 °C ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਹੈ।
ਨਤੀਜਿਆਂ ਤੋਂ ਪਤਾ ਲੱਗਾ ਕਿ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨੇ pH 3.0 'ਤੇ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਿਖਾਈ, pH 3.5 'ਤੇ 94% ਗਤੀਵਿਧੀ ਤੱਕ ਪਹੁੰਚ ਗਈ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਇਹ 2.5 ਤੋਂ 7.0 ਤੱਕ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ਾਲ pH ਰੇਂਜ 'ਤੇ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਰਿਹਾ (ਚਿੱਤਰ 2b)। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਸਨੇ ਨਿਰਪੱਖ ਜਾਂ ਖਾਰੀ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਤੇਜ਼ਾਬੀ ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਿਖਾਈ। ਇਸਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ 2.5 ਤੋਂ 4.5 ਤੱਕ pH ਰੇਂਜ 'ਤੇ ਘੱਟੋ ਘੱਟ 77% ਰਹੀ, ਪਰ pH 7.0 'ਤੇ ਸਿਰਫ ਲਗਭਗ 38% ਤੱਕ ਪਹੁੰਚੀ। *Trametes polyzona* WRF03 ਤੋਂ laccase ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ pH 4.533 ਸੀ, ਜੋ ਕਿ *Trametes polyzona* KU-RNW02737, *Trichoderma harzanium* 39, *Pleurotus* sp. 40, ਅਤੇ *Trametes hirsuta* 41 ਤੋਂ laccases ਲਈ pH ਦੇ ਸਮਾਨ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ, Chairin et al ਦੁਆਰਾ ਕੀਤੇ ਗਏ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ।⁴², *ਪੋਲੀਮੋਰਫਾ f. sp.* WR710-1 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ pH 2.2 ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ *ਪੋਲੀਮੋਰਫਾ f. sp.* IBL-04 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ pH 5.043 ਹੈ। T2/T3 ਲੈਕੇਸ ਦੇ ਤਾਂਬੇ ਦੇ ਪਰਮਾਣੂਆਂ ਨਾਲ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸਾਈਡ ਐਨੀਅਨਾਂ (ਲੈਕੇਸ ਇਨਿਹਿਬਟਰ) ਦਾ ਬੰਨ੍ਹਣਾ ਨਿਰਪੱਖ ਜਾਂ ਖਾਰੀ pH ਹਾਲਤਾਂ ਵਿੱਚ ਘਟੀ ਹੋਈ ਲੈਕੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਕਾਰਨ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਇਹ T1 ਕੇਂਦਰ ਤੋਂ T2/T3 ਕੇਂਦਰ ਵਿੱਚ ਅੰਦਰੂਨੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਨੂੰ ਵਿਗਾੜ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ^{ਸੀਮਤ ਕਰਨਾ}ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ 23,44
ਵੱਖ-ਵੱਖ ਤਾਪਮਾਨਾਂ 'ਤੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨੂੰ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕਰਨ ਨਾਲ, ਇਹ ਪਾਇਆ ਗਿਆ ਕਿ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਸਮਾਂ ਅਤੇ ਤਾਪਮਾਨ ਦੋਵਾਂ ਨੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਸਥਿਰਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕੀਤਾ। ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, *ਟ੍ਰੈਮੇਟਸ ਪੋਲੀਜ਼ੋਨਾ* NRC 620 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਨੇ 40℃ ਅਤੇ 50℃ 'ਤੇ ਉੱਚ ਸਥਿਰਤਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕੀਤੀ, 120 ਮਿੰਟਾਂ ਬਾਅਦ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 68.33% ਅਤੇ 59.61% ਆਪਣੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਬਰਕਰਾਰ ਰੱਖਿਆ (ਚਿੱਤਰ 3a)। ਇਸਦੇ ਉਲਟ, ਉਹੀ ਸਥਿਤੀਆਂ (40℃ ਅਤੇ 50℃, 120 ਮਿੰਟ) ਦੇ ਅਧੀਨ, *ਟ੍ਰੈਮੇਟਸ ਪੋਲੀਜ਼ੋਨਾ* WRF03 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਨੇ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 64.38% ਅਤੇ 42.92% ਆਪਣੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਬਰਕਰਾਰ ਰੱਖਿਆ।³³ਇਸ ਦੇ ਉਲਟ, ਵਧਦੇ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਸਮੇਂ ਅਤੇ ਤਾਪਮਾਨ ਨੇ *ਟ੍ਰੈਮੇਟਸ ਪੋਲੀਜ਼ੋਨਾ* NRC 620 ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਨੂੰ ਘਟਾ ਦਿੱਤਾ; 60℃ ਅਤੇ 70℃ 'ਤੇ 60 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਇਸਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 39.24% ਅਤੇ 1.72% ਤੱਕ ਘੱਟ ਗਈ (ਚਿੱਤਰ 3a)। ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, *ਟ੍ਰੈਮੇਟਸ ਪੋਲੀਜ਼ੋਨਾ* WRF03 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਨੇ ਥਰਮਲ ਟ੍ਰੀਟਮੈਂਟ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੌਰਾਨ 40 ਅਤੇ 50℃ 'ਤੇ ਉੱਚ ਸਥਿਰਤਾ ਦਿਖਾਈ।³³ਇਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਲੁਆਂਗਜਾਰੋਏਂਕਿਟ ਆਦਿ^ਅਲ.37ਅਤੇ ਚੈਰਿਨ ਐਟ^ਅਲ.42ਨੇ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 50 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 1 ਘੰਟੇ ਲਈ ਟ੍ਰਾਮੇਟਸ ਪੌਲੀਜ਼ੋਨਾ KURNW027 ਅਤੇ ਟ੍ਰਾਮੇਟਸ ਪੌਲੀਜ਼ੋਨਾ WR710-1 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਦੀ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੀ। ਵੱਖ-ਵੱਖ ਬਾਇਓਟੈਕਨਾਲੌਜੀ ਖੇਤਰਾਂ ਵਿੱਚ ਲਾਗੂ ਇੱਕ ਉਪਯੋਗੀ ਬਾਇਓਕੈਟਾਲਿਸਟ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ, ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ਾਲ ਤਾਪਮਾਨ ਸੀਮਾ ਵਿੱਚ ਚੰਗੀ ਸਥਿਰਤਾ ਅਤੇ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਥਰਮੋਸਟੈਟਿਕ ਸਥਿਰਤਾ (a) ਅਤੇ pH ਸਥਿਰਤਾ (b)। ਥਰਮੋਸਟੈਟਿਕ ਸਥਿਰਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ 0.05 M ਸੋਡੀਅਮ ਫਾਸਫੇਟ ਬਫਰ (pH 7.0) ਵਿੱਚ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 40, 50, 60, ਅਤੇ 70 °C 'ਤੇ 2 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕਰਕੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। pH ਸਥਿਰਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ 0.1 M ਸਿਟਰੇਟ ਬਫਰ ਅਤੇ ਟ੍ਰਿਸ ਬਫਰ (pH 3, 4, 6, ਅਤੇ 7) ਵਿੱਚ 40 °C 'ਤੇ 2 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕਰਕੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਜੋਂ ABTS ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਬਾਕੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੀ ਗਣਨਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।
ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਅਤੇ ਸਟੋਰੇਜ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਲੈਕੇਸ ਸਥਿਰਤਾ 'ਤੇ pH ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ। ਵੱਖ-ਵੱਖ pH ਮੁੱਲਾਂ ਦੇ ਸੰਪਰਕ ਨੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਢਾਂਚੇ ਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕੀਤਾ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਅਣੂ ਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਅਤੇ ਗਤੀਵਿਧੀ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਹੋਈ। ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਤੇਜ਼ਾਬੀ ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਘੱਟ ਸਥਿਰ ਸੀ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਇਸਨੇ ਉੱਚ pH ਮੁੱਲਾਂ (ਨਿਰਪੱਖ ਅਤੇ ਖਾਰੀ ਖੇਤਰਾਂ) 'ਤੇ ਬਿਹਤਰ ਸਥਿਰਤਾ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ। 7.0, 6.0, 4.0, ਅਤੇ 3.0 ਦੇ pH ਮੁੱਲਾਂ 'ਤੇ, 120 ਮਿੰਟਾਂ ਬਾਅਦ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਧਾਰਨ ਦਰਾਂ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਲਗਭਗ 100%, 62.54%, 52.39%, ਅਤੇ 11.14% ਸਨ (ਚਿੱਤਰ 3b)। *ਸਟ੍ਰੋਂਬਸ ਮਲਟੀਸਸ* WRF03 ਲੈਕੇਸ ਨੇ ਨਿਊਟਰਲ pH ਮੁੱਲਾਂ (5.5–6.5) 'ਤੇ ਉੱਚ ਸਥਿਰਤਾ ਅਤੇ ਤੇਜ਼ਾਬੀ pH ਮੁੱਲਾਂ (4.0 ਤੋਂ ਹੇਠਾਂ) 'ਤੇ ਘੱਟ ਸਥਿਰਤਾ ਦਿਖਾਈ। 5.5, 6.0, ਅਤੇ 6.5 ਦੇ pH ਮੁੱਲਾਂ 'ਤੇ 120 ਮਿੰਟਾਂ ਬਾਅਦ, ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਧਾਰਨ ਦਰ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਲਗਭਗ 82%, 100%, ਅਤੇ 93% ਸੀ।³³ਖੈਰਿਨ ਆਦਿ।⁴²ਨੇ ਨੋਟ ਕੀਤਾ ਕਿ ਟ੍ਰਾਮੇਟਸ ਪੋਲੀਜ਼ੋਨਾ WR710-1 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ 6.0 ਤੋਂ 7.0 ਦੀ pH ਰੇਂਜ ਵਿੱਚ ਸਥਿਰ ਸੀ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਸਈਦ ਅਤੇ ਹੋਰ।⁴⁵ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਲੈਕੇਸ ਨਿਰਪੱਖ pH ਹਾਲਤਾਂ ਵਿੱਚ ਵਧੇਰੇ ਸਥਿਰ ਸੀ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਸੇਰੇਨਾ ਯੂਨੀਕਲਰ ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਨੇ ਖਾਰੀ ਹਾਲਤਾਂ (pH 9.0) ਵਿੱਚ ਵੀ ਸਥਿਰਤਾ ਦਿਖਾਈ।⁴⁶. ਅਧਿਐਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਲੈਕੇਸ ਨੇ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ਾਲ pH ਰੇਂਜ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਸਥਿਰਤਾ ਦਿਖਾਈ। ਇਹ ਉਦਯੋਗਿਕ ਉਪਯੋਗਾਂ ਲਈ ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਕਿਉਂਕਿ ਕੁਝ ਧਾਤੂ ਆਇਨਾਂ ਦੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ ਉਤੇਜਕ ਅਤੇ ਰੋਕਥਾਮ ਦੋਵੇਂ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਇਸ ਲਈ ਉਦਯੋਗਿਕ ਉਪਯੋਗਾਂ ਵਿੱਚ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ 'ਤੇ ਵਿਚਾਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਬਹੁਤ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ ਕਿਉਂਕਿ ਧਾਤੂ ਆਇਨ ਆਮ ਵਾਤਾਵਰਣਕ ਦੂਸ਼ਿਤ ਪਦਾਰਥ ਹਨ ਜੋ ਬਾਹਰੀ ਐਨਜ਼ਾਈਮਾਂ ਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਅਤੇ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।⁴⁷*Pleurotus ostreatus* NRC 620 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ 'ਤੇ ਮਲਟੀਪਲ ਮੈਟਲ ਆਇਨਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਅਨੁਸਾਰੀ ਪ੍ਰਯੋਗ ਕੀਤੇ। ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 4 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਵਰਤੀ ਗਈ ਧਾਤ ਦੀ ਕਿਸਮ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ, ਮੈਟਲ ਆਇਨ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨੂੰ 2.5 mM ਤੋਂ 10 mM ਤੱਕ ਵਧਾਉਣ ਨਾਲ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਫੰਕਸ਼ਨ 'ਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਪ੍ਰਭਾਵ ਪਿਆ। ਉਦਾਹਰਣ ਵਜੋਂ,^{ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ²⁺} , ^ਕੋ²⁺ , ^Zn²⁺, ਅਤੇ^{ਕਿਊ²⁺}ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਉਤੇਜਿਤ ਅਤੇ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ^ਨਾ⁺ , ^ਮਨ²⁺ , ^ਕੈ²⁺, ਅਤੇ^ਕੇ⁺ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਰੋਕ ਸਕਦਾ ਹੈ। 10 mM ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ, *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ਤੋਂ Cu²⁺ ਅਤੇ Mg²⁺ ਆਇਨ ਲੈਕੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੇ ਸਭ ਤੋਂ ਸ਼ਕਤੀਸ਼ਾਲੀ ਐਕਟੀਵੇਟਰ ਸਨ, ਜੋ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਲਗਭਗ 34% ਅਤੇ 20% ਦੀ ਐਕਟੀਵੇਸ਼ਨ ਡਿਗਰੀ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੇ ਸਨ। ਹਾਲਾਂਕਿ, 10 mM ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ, Ca²⁺ ਆਇਨ ਲੈਕੇਸ ਦੇ ਸਭ ਤੋਂ ਸ਼ਕਤੀਸ਼ਾਲੀ ਇਨਿਹਿਬਟਰ ਸਨ, ਜੋ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 60% ਘਟਾਉਂਦੇ ਸਨ।
ਪਲੀਰੋਟਸ ਓਸਟ੍ਰੀਟਸ ਐਨਆਰਸੀ 620 ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ ਧਾਤ ਦੇ ਆਇਨਾਂ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ। ਲੈਕੇਸ ਨੂੰ 2.5 ਐਮਐਮ ਅਤੇ 10 ਐਮਐਮ ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਧਾਤ ਦੇ ਆਇਨਾਂ ਵਾਲੇ ਸੋਡੀਅਮ ਫਾਸਫੇਟ ਬਫਰ (0.05 ਐਮ, ਪੀਐਚ 7.0) ਵਿੱਚ 10 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਫਿਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਸਬਸਟਰੇਟ (ਏਬੀਟੀਐਸ) ਦੇ ਜੋੜ ਦੁਆਰਾ ਸ਼ੁਰੂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਜਿਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਾਪੇਖਿਕ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਸਾਡੇ ਨਤੀਜੇ ਦੂਜੇ ਲੇਖਕਾਂ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦੇ ਹਨ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੇ ਪਾਇਆ ਕਿ Mg²⁺ ਅਤੇ Cu²⁺ *Trametes polyzona* WRF03³ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਵਧਾਉਂਦੇ ਹਨ। Castaño et al.⁴⁸ ਨੇ ਪਾਇਆ ਕਿ *Xylaria* sp. ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਕੁਝ ਹੱਦ ਤੱਕ ਤਾਂਬੇ ਦੇ ਆਇਨਾਂ (Cu²⁺) ਦੁਆਰਾ ਉਤੇਜਿਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, Foroutanfar et al.⁴⁹ ਅਤੇ Si et al.⁵⁰ ਨੇ ਕ੍ਰਮਵਾਰ *Paraconiothyrium variabile* ਅਤੇ *Trametes pubescens* ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ 'ਤੇ ਸਮਾਨ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤੇ। ਇਸ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਕਿਸਮ II ਕਾਪਰ-ਬਾਈਡਿੰਗ ਸਾਈਟ (T2) ਨੂੰ ਇੱਕ ਦਿੱਤੇ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ Cu²⁺ ਨਾਲ ਸੰਤ੍ਰਿਪਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਉੱਚ Cu²⁺³⁹ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ ਲੈਕੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੇ ਉਤੇਜਨਾ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਕਿਉਂਕਿ ਚਿੱਟੇ ਸੜਨ ਵਾਲੇ ਫੰਜਾਈ ਲੈਕੇਸ ਕਈ ਤਾਂਬੇ ਦੇ ਪਰਮਾਣੂਆਂ ਵਾਲੇ ਆਕਸੀਡੇਸ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਲੈਕੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ ਤਾਂਬੇ ਦੇ ਆਇਨਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਵਿਭਿੰਨ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਉਤੇਜਕ ਅਤੇ ਰੋਕਥਾਮ ਤੋਂ ਲੈ ਕੇ ਨਿਰਪੱਖ ਤੱਕ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।⁵¹ ਇਸਦੇ ਉਲਟ, ਝੌ ਐਟ ਅਲ^{. [52]}ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੀ ਕਿ^{ਕਿਊ²⁺}ਤਾਈਵਾਨ ਦੇ ਭੂਮੀਗਤ ਦੀਮਕ (ਓਡੋਂਟੋਟਰਮਸ ਫਾਰਮੋਸੈਨਸ) ਦੀ ਲੈਕੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਰੋਕਿਆ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਸੇਰੇਨਾ ਸਪ. HYB07 ਦੇ ਲੈਕੇਸ^[53]ਅਤੇ ਕਲੀਟੋਸਾਈਬ ਮੈਕਸਿਮਾ^[54]ਤਾਂਬੇ ਦੇ ਆਇਨਾਂ ਤੋਂ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਨਹੀਂ ਹੋਏ।
ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਨੂੰ ਇਸਦੇ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਮਾਪਦੰਡਾਂ (Km ਅਤੇ Vmax) ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ; ਸਬਸਟਰੇਟ ਦੀ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨਾਲ ਬਾਈਡਿੰਗ ਸਾਂਝ ਜਿੰਨੀ ਮਜ਼ਬੂਤ ​​ਹੋਵੇਗੀ, Km ਮੁੱਲ ਓਨਾ ਹੀ ਘੱਟ ਹੋਵੇਗਾ ਅਤੇ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਓਨੀ ਹੀ ਉੱਚੀ ਹੋਵੇਗੀ।^3,21,55*Pleurotus ostreatus* NRC 620 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਦੇ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਮਾਪਦੰਡ (Km ਅਤੇ Vmax) ਲਾਈਨਵੀਵਰ-ਬਰਕ ਪਲਾਟ (ਚਿੱਤਰ 5) ਨੂੰ ਪਲਾਟ ਕਰਕੇ ਗ੍ਰਾਫਪੈਡ ਪ੍ਰਿਜ਼ਮ 6.0 ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ABTS ਨੂੰ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤਦੇ ਸਮੇਂ, ਨਤੀਜੇ 1.99 mM ਅਤੇ 16217 μmol ਸਨ।^{ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਲ⁻¹,}ਕ੍ਰਮਵਾਰ। ਅਲਸਾਈਦ ਅਤੇ ਹੋਰ।²¹ਨੇ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੀ ਕਿ ABTS ਆਕਸੀਕਰਨ ਲਈ Km ਮੁੱਲ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 0.1 mM ਅਤੇ 0.064 mM ਸਨ, ਜੋ ਕਿ ABTS ਲਈ Lac A ਅਤੇ Lac B ਆਈਸੋਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਉੱਚ ਸਾਂਝ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, Vmax ਮੁੱਲ 0.182 μmol ਸਨ।^{ਘੱਟੋ-ਘੱਟ}ਅਤੇ 0.603 μmol^{ਘੱਟੋ-ਘੱਟ}ਕ੍ਰਮਵਾਰ। ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਕਿਲੋਮੀਟਰ ਮੁੱਲ ਟ੍ਰਾਮੇਟਸ ਪੋਲੀਜ਼ੋਨਾ WRF03 (8.66 mM) ਨਾਲੋਂ ਘੱਟ ਸੀ; ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਉਹਨਾਂ ਦਾ Vmax ਮੁੱਲ (1429 mmol ਮਿੰਟ⁻¹) ਵੀ ਸੀ^{ਹੇਠਲਾ}ਜਦੋਂ ABTS ਨੂੰ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।33 ਇਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ, Lentinus squarrosulus MR13 ਅਤੇ Trametes sp. AH28-2 laccase ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ Km ਮੁੱਲ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 0.0714 mM ਅਤੇ 0.025 mM ਸਨ, ਅਤੇ Vmax ਮੁੱਲ 0.0091 mM min−1 ਅਤੇ 0.67 mM min−1 mg−1 (ABTS ਦੇ ਸਾਪੇਖਕ) ਸਨ।^{ਕ੍ਰਮਵਾਰ।56,57}
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ ABTS ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ, ਅਤੇ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵੇਗ ਬਨਾਮ ABTS ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਪਰਸਪਰ ਦਾ ਇੱਕ ਲਾਈਨਵੀਵਰ-ਬਰਕ ਪਲਾਟ ਪਲਾਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (0.025–3.0 mM) ਵਾਲੀ ABTS ਦੀ ਆਕਸੀਕਰਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ pH 4.5 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਤਾਂ ਜੋ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਮਾਪਦੰਡ (Vmax ਅਤੇ Km) ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੇ ਜਾ ਸਕਣ। ਮਾਈਕਲਿਸ-ਮੈਂਟੇਨ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਸਥਿਰਾਂਕਾਂ ਦੀ ਗਣਨਾ ਸਬਸਟਰੇਟ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਬਨਾਮ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵੇਗ ਦੇ ਪਰਸਪਰ ਦੇ ਲਾਈਨਵੀਵਰ-ਬਰਕ ਪਲਾਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੀਤੀ ਗਈ। ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਸਥਿਰਾਂਕਾਂ ਦੀ ਗਣਨਾ ਗ੍ਰਾਫਪੈਡ ਪ੍ਰਿਜ਼ਮ 6.01 ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਲਾਈਨਵੀਵਰ-ਬਰਕ ਪਲਾਟ ਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ।
ਰਵਾਇਤੀ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਐਨਜ਼ਾਈਮ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪੈਕਟਿਨੇਸ, ਪੈਕਟਿਕ ਪਦਾਰਥਾਂ ਨੂੰ ਹਾਈਡ੍ਰੋਲਾਈਜ਼ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਲੇਸ ਅਤੇ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਇਹ ਢਾਂਚਾਗਤ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਤੋੜਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਅਕਸਰ ਉਪਜ ਅਤੇ ਸਪਸ਼ਟਤਾ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਦੂਜੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮਾਂ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸੈਲੂਲੇਸ ਅਤੇ ਹੇਮੀਸੈਲੂਲੇਸ ਦੇ ਨਾਲ ਸੁਮੇਲ ਵਿੱਚ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਪੈਕਟਿਨੇਸ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਨਹੀਂ ਬਣਾਉਂਦੇ, ਜੋ ਕਿ ਗੰਦਗੀ ਅਤੇ ਆਕਸੀਡੇਟਿਵ ਭੂਰੇਪਨ ਲਈ ਮੁੱਖ ਯੋਗਦਾਨ ਪਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਖਾਸ ਕਰਕੇ ਸੇਬ ਅਤੇ ਅੰਗੂਰ ਦੇ ਜੂਸ ਵਰਗੇ ਜੂਸਾਂ ਵਿੱਚ।⁵⁸ਇਸ ਦੇ ਉਲਟ, ਲੈਕੇਸ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੇ ਆਕਸੀਕਰਨ ਨੂੰ ਉਤਪ੍ਰੇਰਕ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਵੱਡੇ, ਅਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਅਣੂਆਂ ਵਿੱਚ ਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ ਕਰਦੇ ਹਨ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਸੈਡੀਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਜਾਂ ਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਦੁਆਰਾ ਹਟਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਵਿਧੀ ਨਾ ਸਿਰਫ਼ ਸਪਸ਼ਟਤਾ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਬਣਾਉਂਦੀ ਹੈ ਬਲਕਿ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਕਾਰਨ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਆਕਸੀਡੇਟਿਵ ਭੂਰੇਪਨ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਨੂੰ ਘਟਾ ਕੇ ਜੂਸ ਦੀ ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ ਨੂੰ ਵੀ ਵਧਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਲੈਕੇਸ-ਅਧਾਰਤ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਨੂੰ ਹਲਕੇ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਹਾਲਤਾਂ (pH 3.5–5.5, ਤਾਪਮਾਨ 25–40 °C) ਦੇ ਅਧੀਨ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਪੋਸ਼ਣ ਜਾਂ ਆਰਗੈਨੋਲੇਪਟਿਕ ਗੁਣਾਂ ਨਾਲ ਸਮਝੌਤਾ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ ਨਾਜ਼ੁਕ ਜੂਸ ਲਈ ਢੁਕਵਾਂ ਬਣਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।⁵⁹ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ ਪੈਕਟਿਨੇਜ ਇਲਾਜ 1-2 ਘੰਟਿਆਂ ਵਿੱਚ ਜੂਸ ਨੂੰ ਸਪੱਸ਼ਟ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਲੈਕੇਸ ਇਲਾਜ ਨੂੰ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਘਟਾਉਣ ਲਈ ਲੰਬੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਸਮੇਂ (3-6 ਘੰਟੇ) ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਇਸ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਨੂੰ ਸਥਿਰ ਕਰਕੇ ਜਾਂ ਲੈਕੇਸ ਨੂੰ ਮਕੈਨੀਕਲ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਤਰੀਕਿਆਂ ਨਾਲ ਜੋੜ ਕੇ ਅਨੁਕੂਲ ਬਣਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।⁶⁰ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਕੱਚੇ ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਦੀ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਿੰਗ ਨੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਲੈਕੇਸ ਅਤੇ α-ਐਮੀਲੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਦਾ ਖੁਲਾਸਾ ਕੀਤਾ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਪੈਕਟਿਨੇਜ ਅਤੇ ਜ਼ਾਈਲਨੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਸਨ, ਅਤੇ ਸੈਲੂਲੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਪਤਾ ਨਹੀਂ ਲਗਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਇਸ ਲਈ, ਟਰਬਿਡਿਟੀ ਅਤੇ ਫੀਨੋਲਿਕ ਸਮੱਗਰੀ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਕਾਰਨ ਸੀ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਲੇਸ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲੀ ਅੰਸ਼ਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਐਮੀਲੇਜ਼ ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਕਾਰਨ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਸਾਰਣੀ 1 ਤਾਜ਼ੇ ਨਿਚੋੜੇ ਹੋਏ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਅਤੇ ਲੈਕੇਸ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਭੌਤਿਕ-ਰਸਾਇਣਕ ਮਾਪਦੰਡ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਤਾਜ਼ੇ ਨਿਚੋੜੇ ਹੋਏ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ (71.59%) ਦੀ ਪੈਦਾਵਾਰ ਲੈਕੇਸ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ (87.34%) ਨਾਲੋਂ ਘੱਟ ਸੀ। ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਪਿਲਨਿਕ ਅਤੇ ਔਰੇਂਜ ਦੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦੇ ਹਨ।⁶¹, ਜਿਸਨੇ ਸੰਕੇਤ ਦਿੱਤਾ ਕਿ ਫਲਾਂ ਦੀ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਵਿੱਚ ਐਨਜ਼ਾਈਮਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਜੂਸ ਦੀ ਪੈਦਾਵਾਰ ਨੂੰ ਵਧਾ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਲਈ ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲਾ, ਸਾਫ਼ ਜੂਸ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਜੂਸ ਦੀ ਪੈਦਾਵਾਰ ਵਿੱਚ ਵਾਧਾ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜੂਸ ਵਿੱਚ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਸ਼ੱਕਰ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਵਿੱਚ ਵਾਧੇ ਕਾਰਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਫਲਾਂ ਦੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਹਾਈਡ੍ਰੋਲਾਇਸਿਸ ਦੌਰਾਨ, ਉਤਪਾਦ ਦੀਆਂ ਸੈੱਲ ਕੰਧਾਂ ਵਿੱਚ ਮੇਸੋਗਲੀਆ ਅਤੇ ਪੈਕਟਿਨ ਨਸ਼ਟ ਹੋ ਜਾਂਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਪਦਾਰਥਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਨਿਰਪੱਖ ਸ਼ੱਕਰ ਅਤੇ ਐਸਿਡ ਵਿੱਚ ਬਦਲ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।^{62 .}ਐਨਜ਼ਾਈਮ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦਾ pH ਮੁੱਲ ਕੰਟਰੋਲ ਸਮੂਹ (P < 0.05) ਨਾਲੋਂ ਕਾਫ਼ੀ ਘੱਟ ਸੀ, ਅਤੇ ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ ਦੋਵਾਂ ਸਮੂਹਾਂ ਦਾ pH ਮੁੱਲ ਕਾਫ਼ੀ ਵਧਿਆ (ਸਾਰਣੀ 1)। ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਮਾਰਕ ਐਟ ਅਲ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਹਨ।⁶³, ਜਿਸਨੇ ਨੋਟ ਕੀਤਾ ਕਿ ਗਰਮੀ ਦੇ ਇਲਾਜ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਟੋਰੇਜ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਕਾਜੂ ਫਲਾਂ ਦੇ ਜੂਸ ਦਾ pH ਘੱਟ ਗਿਆ। ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਇਲਾਜ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਪੈਕਟਿਨ ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਗਲੈਕਟੂਰੋਨਿਕ ਐਸਿਡ ਬਣਨਾ ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ pH ਵਿੱਚ ਵਾਧੇ ਲਈ ਜ਼ਿੰਮੇਵਾਰ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਐਨਜ਼ਾਈਮ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦਾ pH ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ 4.05 ਅਤੇ 4.31 ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਰਿਹਾ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਅਣ-ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦਾ pH 4.12 ਅਤੇ 4.33 ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਰਿਹਾ।
ਇਲਾਜ ਨਾ ਕੀਤੇ ਗਏ ਅਤੇ ਲੈਕੇਸ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਗਏ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਕੁੱਲ ਐਸਿਡਿਟੀ (TA) ਨੇ ਵਧਦੇ ਸਟੋਰੇਜ ਸਮੇਂ ਦੇ ਨਾਲ ਘਟਦੀ ਰੁਝਾਨ ਦਿਖਾਈ (ਸਾਰਣੀ 1)। ਐਸਿਡਿਟੀ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਦਾ ਕਾਰਨ ਜੈਵਿਕ ਐਸਿਡਾਂ ਦੇ ਕਾਰਬੋਹਾਈਡਰੇਟ ਵਿੱਚ ਪਰਿਵਰਤਨ ਜਾਂ ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਦੇ ਨਾਲ-ਨਾਲ ਜੂਸ ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ ਆਕਸੀਕਰਨ ਸੀ।⁶⁴ਕੰਟਰੋਲ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਅਤੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਕੁੱਲ ਐਸੀਡਿਟੀ ਦੂਜੇ ਜੂਸਾਂ (ਸਟ੍ਰਾਬੇਰੀ ਜੂਸ 0.9%, ਆਲੂਬੁਖਾਰੇ ਦਾ ਜੂਸ 2.2%, ਕੁਮਕੁਆਟ ਜੂਸ 1.0%, ਖੁਰਮਾਨੀ ਦਾ ਜੂਸ 2.4%, ਸੰਤਰੇ ਦਾ ਜੂਸ 0.8%) ਨਾਲੋਂ ਘੱਟ ਸੀ, ਪਰ ਦੂਜੇ ਜੂਸਾਂ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਨਾਸ਼ਪਾਤੀ ਦਾ ਜੂਸ 0.3%) ਦੇ ਸਮਾਨ ਸੀ।⁶²ਇਲਾਜ ਨਾ ਕੀਤੇ ਗਏ ਤਾਜ਼ੇ ਨਿਚੋੜੇ ਹੋਏ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਵਿੱਚ ਇਹ ਅੰਤਰ ਕਈ ਕਾਰਕਾਂ ਕਰਕੇ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਵਧ ਰਹੀ ਸਥਿਤੀਆਂ, ਜੈਨੇਟਿਕ ਕਾਰਕ, ਪਰਿਪੱਕਤਾ ਪੱਧਰ, ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਵਿਧੀਆਂ।⁶⁵ਕੰਟਰੋਲ ਅਤੇ ਲੈਕੇਸ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੀ ਕੁੱਲ ਐਸਿਡਿਟੀ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਸਿੰਘ ਅਤੇ ਹੋਰਾਂ ਦੁਆਰਾ ਪੇਸ਼ ਕੀਤੇ ਗਏ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੇ ਅਨੁਕੂਲ ਹੈ।⁶⁶74 ਦਿਨਾਂ ਦੀ ਸਟੋਰੇਜ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਜਿਨ ਨੂਓ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੀ ਕੁੱਲ ਐਸਿਡਿਟੀ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਦੇ ਸੰਬੰਧ ਵਿੱਚ। ਦੂਜੇ ਪਾਸੇ, ਓਸ਼ਮੀਅਨਸਕੀ ਅਤੇ ਵੋਜਡਾਈਲੋ⁶⁷ਰਵਾਇਤੀ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੀ ਐਸੀਡਿਟੀ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਬਦਲਾਅ ਨਹੀਂ ਮਿਲਿਆ।
ਸਾਰਣੀ 1 ਵਿੱਚ ਪੇਸ਼ ਕੀਤੇ ਗਏ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਲੈਕੇਸ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦਾ ਕੁੱਲ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਠੋਸ (TSS) ਮੁੱਲ ਅਣ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨੇ ਨਾਲੋਂ ਵੱਧ ਸੀ। ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਿਤ ਅਧਿਐਨਾਂ ਦੇ ਅਨੁਕੂਲ ਹਨ।^{. 68}ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਸਾਰਣੀ 1 ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ ਕਿ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ ਕੰਟਰੋਲ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਸਮੂਹ ਦਾ TSS ਮੁੱਲ 9.58 ਸੀ ਅਤੇ ਸਟੋਰੇਜ ਅਵਧੀ ਦੇ ਅੰਤ ਤੱਕ 11.05 ਤੱਕ ਪਹੁੰਚ ਗਿਆ। ਇਹ ਮੁੱਲ ਹਾਮਿਦ ਅਤੇ ਹੋਰਾਂ ਦੁਆਰਾ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਤਾਜ਼ੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ TSS ਮੁੱਲਾਂ ਨਾਲੋਂ ਘੱਟ ਹਨ।^{. 69}(ਕ੍ਰਮਵਾਰ 11.2 ਅਤੇ 11.80)। ਲੈਕੇਸ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦਾ TSS ਮੁੱਲ ਕਾਫ਼ੀ ਵਧਿਆ, 11.23 ਤੋਂ ਸ਼ੁਰੂ ਹੋ ਕੇ 4°C (ਸਾਰਣੀ 1) 'ਤੇ ਦੋ ਹਫ਼ਤਿਆਂ ਦੇ ਸਟੋਰੇਜ ਤੋਂ ਬਾਅਦ 12.93 ਤੱਕ ਪਹੁੰਚ ਗਿਆ। ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ TSS ਵਿੱਚ ਇਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦਾ ਵਾਧਾ ਨਿੰਬੂ ਜਾਤੀ ਦੇ ਫਲਾਂ, ਨਿੰਬੂ ਅਤੇ ਮਿੱਠੇ ਸੰਤਰਿਆਂ ਵਿੱਚ ਵੀ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ। ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ ਕੁੱਲ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਠੋਸ ਪਦਾਰਥਾਂ (TSS) ਵਿੱਚ ਵਾਧਾ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਾਂ (ਸਟਾਰਚ) ਦੇ ਮੋਨੋਸੈਕਰਾਈਡਾਂ (ਸ਼ੱਕਰ) ਵਿੱਚ ਹਾਈਡ੍ਰੋਲਾਇਸਿਸ, ਜੂਸ ਡੀਹਾਈਡਰੇਸ਼ਨ ਕਾਰਨ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਵਿੱਚ ਵਾਧਾ, ਅਤੇ ਜੂਸ ਵਿੱਚ ਪੈਕਟਿਨ ਦੇ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਠੋਸ ਪਦਾਰਥਾਂ ਵਿੱਚ ਗਿਰਾਵਟ ਦੇ ਕਾਰਨ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਕੁੱਲ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਠੋਸ ਪਦਾਰਥਾਂ (TSS) ਵਿੱਚ ਵਾਧਾ ਸੰਭਾਵਤ ਤੌਰ 'ਤੇ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਸ਼ੱਕਰ ਵਿੱਚ ਵਾਧੇ ਦੇ ਕਾਰਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਪੈਕਟਿਨ ਜਾਂ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਨੂੰ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਪੈਕਟਿਨ ਜਾਂ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਦੁਆਰਾ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਸ਼ੱਕਰ ਵਿੱਚ ਬਦਲਣ ਦੁਆਰਾ, ਜਾਂ ਸਟਾਰਚ ਦੇ ਸ਼ੂਗਰ ਵਿੱਚ ਹਾਈਡ੍ਰੋਲਾਇਸਿਸ ਦੁਆਰਾ ਬਣਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਹੈਮਡ ਐਟ ਅਲ ਦੁਆਰਾ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।^69.ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਗੁਣਾਂ 'ਤੇ ਲੈਕੇਸ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦ੍ਰਿਸ਼ਟੀਗਤ ਤੌਰ 'ਤੇ ਦੇਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਲੈਕੇਸ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਵਿੱਚ ਬਿਨਾਂ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਜੂਸ ਨਾਲੋਂ ਬਿਹਤਰ ਪ੍ਰਵਾਹਯੋਗਤਾ ਅਤੇ ਘੱਟ ਲੇਸ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦੀ ਹੈ। ਇਹ ਨਿਰੀਖਣ ਸਾਰਣੀ 1 ਵਿੱਚ ਦਰਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ; ਐਨਜ਼ਾਈਮ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਲੇਸ 1.87 cP ਸੀ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਨਿਯੰਤਰਣ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਲੇਸ 2.95 cP ਸੀ। ਲੇਸ ਵਿੱਚ ਇਹ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਕਮੀ ਸੰਭਾਵਤ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੈਕਟਿਨ ਵਰਗੇ ਪਦਾਰਥਾਂ ਦੀ ਉੱਚ ਪਾਣੀ-ਰੱਖਣ ਸਮਰੱਥਾ ਅਤੇ ਇੱਕ ਸੰਯੁਕਤ ਨੈੱਟਵਰਕ ਢਾਂਚੇ ਦੇ ਗਠਨ ਦੇ ਕਾਰਨ ਹੈ।
ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਭੂਰੇਪਨ ਸੂਚਕਾਂਕ (BI) 'ਤੇ ਲੈਕੇਸ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੀ ਜਾਂਚ ਇੱਕ ਸਪੈਕਟਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ 420 nm 'ਤੇ ਸੋਖਣ ਨੂੰ ਮਾਪ ਕੇ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਨਤੀਜੇ ਸਾਰਣੀ 1 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਏ ਗਏ ਹਨ। ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ, ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਅਤੇ ਇਲਾਜ ਨਾ ਕੀਤੇ ਗਏ ਦੋਵਾਂ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ BI ਨੇ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਵਧਦੇ ਰੁਝਾਨ ਨੂੰ ਦਿਖਾਇਆ। BI ਭੂਰੇਪਨ ਦੀ ਡਿਗਰੀ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਕੰਮ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ^{ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ}ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਅਤੇ ਗੈਰ-ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਭੂਰੇਪਣ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਦਾ ਸੂਚਕ। ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ ਸੋਖਣ ਵਿੱਚ ਕਾਫ਼ੀ ਵਾਧਾ ਹੋਇਆ (P < 0.05)। ਸਟੋਰੇਜ ਦੇ ਅੰਤ 'ਤੇ,_ਏ420ਕੰਟਰੋਲ ਅਤੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਮੁੱਲ ਵਿੱਚ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਲਗਭਗ 217% ਅਤੇ 121% ਦਾ ਵਾਧਾ ਹੋਇਆ ਹੈ (ਸਾਰਣੀ 1)। ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਇਲਾਜ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਭੂਰੇਪਨ ਦੀ ਡਿਗਰੀ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 56% ਘਟਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਬੇਜ਼ੇਰਾ ਐਟ ਅਲ ਦੇ ਨਤੀਜੇ।^[19]] ਸਾਡੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ ਹਨ; ਉਨ੍ਹਾਂ ਨੇ ਸੇਬ ਦੇ ਰਸ ਨੂੰ ਸਪੱਸ਼ਟ ਕਰਨ ਲਈ ਲੈਕੇਸ-ਗਲੂਟਾਰਾਲਡੀਹਾਈਡ-ਨਾਰੀਅਲ ਫਾਈਬਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਇਸਦਾ ਅਸਲੀ ਰੰਗ 61% ਘਟ ਗਿਆ।
ਹਾਲਾਂਕਿ ਫਲਾਂ ਦੇ ਜੂਸਾਂ ਵਿੱਚ ਪੌਲੀਫੇਨੌਲ ਮਨੁੱਖੀ ਸਰੀਰ 'ਤੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਪੌਸ਼ਟਿਕ ਅਤੇ ਇਲਾਜ ਪ੍ਰਭਾਵ ਪਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਇਹ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨਾਲ ਵੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਜੂਸ ਵਿੱਚ ਬੱਦਲਵਾਈ, ਤਲਛਟ ਜਾਂ ਗੰਦਗੀ ਪੈਦਾ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਉਤਪਾਦ ਦੇ ਸੁਆਦ ਅਤੇ ਖੁਸ਼ਬੂ ਵਿੱਚ ਬਦਲਾਅ ਆਉਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸਦੀ ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ ਘੱਟ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।⁷¹ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਦਾ ਉਦੇਸ਼ ਪਲੀਰੋਟਸ ਓਸਟ੍ਰੀਟਸ ਐਨਆਰਸੀ 620 ਤੋਂ ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਵਿੱਚ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਸਮੱਗਰੀ ਨੂੰ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਢੰਗ ਨਾਲ ਘਟਾਉਣਾ ਸੀ। ਸਾਰਣੀ 1 ਵਿੱਚ ਪੇਸ਼ ਕੀਤੇ ਗਏ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਲੈਕੇਸ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੀ ਕੁੱਲ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਸਮੱਗਰੀ 4 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਸਟੋਰੇਜ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਕਾਫ਼ੀ ਘੱਟ ਗਈ ਸੀ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਅਧਿਐਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਦੋਵਾਂ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ ਕੁੱਲ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਸਮੱਗਰੀ ਵੀ ਘਟ ਗਈ (ਸਾਰਣੀ 1)। ਸੈਂਡਰੀ ਅਤੇ ਹੋਰ ਦੁਆਰਾ ਖੋਜ।⁷²ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ ਕਿ ਐਨਜ਼ਾਈਮ-ਇਲਾਜ ਕੀਤਾ ਸੇਬ ਦਾ ਜੂਸ ਆਪਣੀ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਅਤੇ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਸਮੱਗਰੀ ਨੂੰ ਬਰਕਰਾਰ ਰੱਖ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਲੈਟੇਰਾ ਐਟ ਅਲ ਦੁਆਰਾ ਇੱਕ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਨਤੀਜੇ।⁷³ਇਹ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਸੰਤਰੇ ਦੇ ਜੂਸ ਦਾ ਫੰਗਲ ਲੈਕੇਸ ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕਰਨ ਨਾਲ ਇਸ ਵਿੱਚ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾ 45% ਤੱਕ ਘਟ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਵਿੱਚ ਫ੍ਰੀ ਰੈਡੀਕਲ ਸਕੈਵੇਂਜਿੰਗ, ਸਿੰਗਲੇਟ ਆਕਸੀਜਨ ਘਟਾਉਣ ਅਤੇ ਬੁਝਾਉਣ, ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਐਟਮ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ, ਅਤੇ ਫ੍ਰੀ ਰੈਡੀਕਲਸ ਨੂੰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ ਦਾਨ ਵਰਗੇ ਗੁਣ ਪਾਏ ਗਏ ਹਨ, ਜੋ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਸ਼ਕਤੀਸ਼ਾਲੀ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ।⁷⁴ਇਸ ਲਈ, ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, DPPH ਅਤੇ FRAP-ਅਧਾਰਿਤ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ 14 ਦਿਨਾਂ ਲਈ ਫਰਿੱਜ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕੀਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਦੀ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ ਲੈਕੇਸ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ (ਸਾਰਣੀ 2)। ਦੋਵਾਂ ਤਰੀਕਿਆਂ ਨੇ ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਵਾਧਾ ਦਿਖਾਇਆ, ਜੋ ਕਿ ਮੁਫਤ ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਵਿੱਚ ਵਾਧੇ ਜਾਂ ਮੇਲਾਰਡ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਉਤਪਾਦਾਂ (MRPs) ਦੇ ਗਠਨ ਦੇ ਕਾਰਨ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਮੇਲਾਰਡ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਉਤਪਾਦ ਸੰਭਾਵਤ ਤੌਰ 'ਤੇ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਵਾਧੇ ਦਾ ਕਾਰਨ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ।⁷⁵ਗੈਰ-ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਭੂਰੇ ਰੰਗ ਦੀਆਂ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ (ਐਸਕੋਰਬਿਕ ਐਸਿਡ ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ, ਮੇਲਾਰਡ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ, ਅਤੇ ਸ਼ੱਕਰ ਦੇ ਐਸਿਡ-ਉਤਪ੍ਰੇਰਿਤ ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ ਸਮੇਤ) ਭੂਰੇ ਰੰਗ (ਮੇਲੈਨੋਇਡਿਨ) ਪੈਦਾ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ। ਵਿਚਕਾਰਲੇ ਐਸਕੋਰਬਿਕ ਐਸਿਡ ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ ਉਤਪਾਦ ਅਤੇ ਸ਼ੂਗਰ ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ ਉਤਪਾਦ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਕਾਰਬੋਨੀਲ ਮਿਸ਼ਰਣ) ਮੇਲਾਰਡ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਰਾਹੀਂ ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡ ਨਾਲ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।⁷⁶ਹਾਲਾਂਕਿ ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ ਫਲਾਂ ਅਤੇ ਸਬਜ਼ੀਆਂ ਦੇ ਭੂਰੇ ਹੋਣ ਦਾ ਵਿਆਪਕ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ, ਪਰ ਇਹਨਾਂ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਬਾਰੇ ਸਾਡੀ ਸਮਝ ਸੀਮਤ ਹੈ।⁷⁷FRAP ਵਿਧੀ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ, ਲੈਕੇਸ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਨੇ DPPH ਵਿਧੀ (ਸਾਰਣੀ 2) ਦੁਆਰਾ ਕਾਫ਼ੀ ਘੱਟ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਿਖਾਈ, ਅਤੇ ਸਾਰੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਵਧਦੇ ਸਟੋਰੇਜ ਸਮੇਂ ਦੇ ਨਾਲ ਕਾਫ਼ੀ ਵਧ ਗਈ। ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਦੋ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਕਿਉਂਕਿ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਸਿਧਾਂਤ ਵੱਖਰੇ ਹਨ। DPPH ਵਿਧੀ ਫ੍ਰੀ ਰੈਡੀਕਲਸ ਨੂੰ ਬੇਅਸਰ ਕਰਨ ਦੀ ਯੋਗਤਾ ਨੂੰ ਮਾਪਦੀ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ FRAP ਵਿਧੀ ਆਇਰਨ ਆਇਨਾਂ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਦੀ ਯੋਗਤਾ ਨੂੰ ਮਾਪਦੀ ਹੈ। ਇਸ ਲਈ, ਅਧਿਐਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਢੰਗ ਨਾਲ ਸਮਝਣ ਲਈ ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਕਈ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।⁷⁸
ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਮੁੱਖ ਨਤੀਜਿਆਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਇਹ ਹੈ ਕਿ *Pleurotus ostreatus* laccase NRC 620 70°C ਅਤੇ pH 3.0 'ਤੇ ਅਨੁਕੂਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਜੂਸ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਲਈ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹੋਰ ਫੰਗਲ ਲੈਕੇਸਾਂ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ *Trametes versicolor* ਅਤੇ *Ganoderma lucidum* laccases ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ, *P. ostreatus* NRC 620 ਉੱਚ ਥਰਮਲ ਸਥਿਰਤਾ ਅਤੇ ਵਧੇਰੇ ਤੇਜ਼ਾਬੀ pH ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ। *Trametes versicolor* ਅਤੇ *Ganoderma lucidum* ਦੇ ਲੈਕੇਸਾਂ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ 50-60°C ਦੀ ਰੇਂਜ ਵਿੱਚ ਅਤੇ 3.5 ਅਤੇ 5.0 ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ pH ਮੁੱਲਾਂ 'ਤੇ ਅਨੁਕੂਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਇਹ ਅੰਤਰ ਬਿਹਤਰ ਜੂਸ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਵਿੱਚ ਯੋਗਦਾਨ ਪਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਖਾਸ ਕਰਕੇ ਤੇਜ਼ਾਬੀ ਜੂਸਾਂ ਲਈ ਜਿੱਥੇ ਘੱਟ pH ਮੁੱਲਾਂ 'ਤੇ ਸਥਿਰਤਾ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ। *P. ਦੀ ਵਿਲੱਖਣ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ। ਹੋਰ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤੇ ਫੰਗਲ ਲੈਕੇਸਾਂ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ, *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ਵਧੇਰੇ ਚੁਣੌਤੀਪੂਰਨ ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਕੰਮ ਕਰਨ ਦੀ ਯੋਗਤਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਇਸਦਾ ਉੱਚ ਅਨੁਕੂਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਤਾਪਮਾਨ ਉਦਯੋਗਿਕ ਉਪਯੋਗਾਂ ਵਿੱਚ ਸੰਭਾਵੀ ਫਾਇਦਿਆਂ ਦਾ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਤੇਜ਼ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਰਾਂ ਅਤੇ ਘਟੀ ਹੋਈ ਮਾਈਕ੍ਰੋਬਾਇਲ ਗੰਦਗੀ। ਇਸਦਾ ਘੱਟ pH, ਜੋ ਕਿ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਜੂਸਾਂ ਦੇ ਤੇਜ਼ਾਬੀ ਸੁਭਾਅ ਦੇ ਅਨੁਕੂਲ ਹੈ, ਜੂਸ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ ਲਾਭਦਾਇਕ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਵੱਡੇ ਪੱਧਰ 'ਤੇ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਲਈ ਹੋਰ ਖੋਜ ਨੂੰ ਜਾਇਜ਼ ਠਹਿਰਾਉਂਦੇ ਹਨ, *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ਨੂੰ ਰਵਾਇਤੀ ਫੰਗਲ ਲੈਕੇਸ ਸਰੋਤਾਂ ਦਾ ਇੱਕ ਵਿਹਾਰਕ ਵਿਕਲਪ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ, ਅਸੀਂ ਪਾਇਆ ਕਿ ਅਨੁਕੂਲ ਤਾਪਮਾਨ 60°C ਹੈ ਅਤੇ ਅਨੁਕੂਲ pH 3.0 ਹੈ। 80 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 60°C 'ਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, *Ganoderma lucidum* ਲੈਕੇਸ ਨੂੰ ਬਰਕਰਾਰ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ।⁴⁶ਇਸਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ %।79 ਕੁਰਨੀਆਵਤੀ ਅਤੇ ਨਿਕੇਲ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ⁸⁰, *ਗੈਨੋਡਰਮਾ ਲੂਸੀਡਮ* ਐਨਜ਼ਾਈਮ 25°C ਅਤੇ pH ਮੁੱਲ 5.0 ਤੋਂ 8.0 ਤੱਕ, ਅਤੇ pH 6.0 ਅਤੇ ਤਾਪਮਾਨ 10 ਤੋਂ 30°C ਤੱਕ ਸਥਿਰਤਾ 'ਤੇ ਸ਼ਾਨਦਾਰ ਤੋਂ ਦਰਮਿਆਨੀ ਸਥਿਰਤਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ਪਾਇਆ ਕਿ *ਪਲੇਰੋਟਸ ਓਸਟ੍ਰੀਟਸ* ਲਈ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਲਈ ਸਰਵੋਤਮ pH ਅਤੇ ਤਾਪਮਾਨ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 3.0 ਅਤੇ 70°C ਸੀ। 40°C ਅਤੇ 50°C 'ਤੇ ਦੋ ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨੇ ਆਪਣੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 68.33% ਅਤੇ 59.61% ਬਰਕਰਾਰ ਰੱਖਿਆ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਪਲੀਰੋਟਸ ਓਸਟ੍ਰੀਟਸ NRC 620 ਲੈਕੇਸ ਨੇ 50°C ਤੋਂ 80°C ਤੱਕ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ਾਲ ਤਾਪਮਾਨ ਸੀਮਾ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਗਤੀਵਿਧੀ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕੀਤੀ, ਲਗਭਗ ਵੱਧ ਤੋਂ ਵੱਧ ਗਤੀਵਿਧੀ (69%–98%) ਤੱਕ ਪਹੁੰਚ ਗਈ, ਵੱਧ ਤੋਂ ਵੱਧ ਗਤੀਵਿਧੀ 70°C 'ਤੇ ਦੇਖੀ ਗਈ।
ਸਿੱਟੇ ਵਜੋਂ, ਸਥਿਰ ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਓਇਸਟਰ ਮਸ਼ਰੂਮ ਲੈਕੇਸ NRC620 ਨੇ pH ਅਤੇ ਤਾਪਮਾਨ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦੀ ਇੱਕ ਸ਼੍ਰੇਣੀ ਵਿੱਚ ਅਨੁਕੂਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਅਤੇ ਸਥਿਰਤਾ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ, ਦੂਜੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਸਰੋਤਾਂ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਵਧੀਆ ਸਥਿਰਤਾ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ। 10 mM MgSO₄ ਅਤੇ CuSO₄ ਦੇ ਜੋੜ ਨੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਲਗਭਗ 21% ਅਤੇ 35% ਦਾ ਵਾਧਾ ਕੀਤਾ। ਜਦੋਂ ਸੇਬ ਦੇ ਜੂਸ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰੋਸੈਸ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨੇ pH ਅਤੇ ਲੇਸ ਨੂੰ ਘਟਾਇਆ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਸਟੋਰੇਜ ਦੌਰਾਨ ਫੀਨੋਲਿਕ ਸਮੱਗਰੀ ਵਿੱਚ ਥੋੜ੍ਹੀ ਜਿਹੀ ਕਮੀ ਆਈ।
ਨਤੀਜੇ ਭੋਜਨ ਉਦਯੋਗ ਵਿੱਚ ਲੈਕੇਸ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਖਾਸ ਕਰਕੇ ਪੀਣ ਵਾਲੇ ਪਦਾਰਥਾਂ ਦੇ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਵਿੱਚ। ਫੀਨੋਲਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਤੋੜ ਕੇ, ਲੈਕੇਸ ਨਾ ਸਿਰਫ਼ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸਪਸ਼ਟਤਾ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ ਬਲਕਿ ਹਲਕੇ ਕਾਰਜਸ਼ੀਲ ਹਾਲਤਾਂ ਵਿੱਚ ਫਲਾਂ ਦੇ ਜੂਸ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨੂੰ ਵੀ ਬਣਾਈ ਰੱਖਦਾ ਹੈ। ਜੈਲੇਟਿਨ, ਬੈਂਟੋਨਾਈਟ ਅਤੇ ਸਿਲਿਕਾ ਜੈੱਲ ਵਰਗੇ ਰਵਾਇਤੀ ਸਪਸ਼ਟੀਕਰਨ ਏਜੰਟਾਂ ਦੇ ਉਲਟ, ਲੈਕੇਸ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਪੈਦਾ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ ਜਾਂ ਪੀਣ ਵਾਲੇ ਪਦਾਰਥਾਂ ਤੋਂ ਸੁਹਾਵਣਾ ਖੁਸ਼ਬੂਆਂ ਨੂੰ ਨਹੀਂ ਹਟਾਉਂਦਾ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਇਹ ਇੱਕ ਵਧੇਰੇ ਵਾਤਾਵਰਣ ਅਨੁਕੂਲ ਅਤੇ ਟਿਕਾਊ ਵਿਕਲਪ ਬਣਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਹੋਰ ਐਨਜ਼ਾਈਮਾਂ ਅਤੇ ਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ, ਲੈਕੇਸ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਾਲ ਸਮਝੌਤਾ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ ਇੱਕ ਨਿਸ਼ਾਨਾਬੱਧ ਅਤੇ ਲਾਗਤ-ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਹੱਲ ਪੇਸ਼ ਕਰਦਾ ਹੈ।
ਕਿਓਮੁਹਿੰਬੋ, ਐਚਡੀ ਅਤੇ ਬ੍ਰਿੰਕ, ਐਚਜੀ। ਤਾਂਬੇ ਵਾਲੇ ਲੈਕੇਸ ਦੇ ਉਪਯੋਗ ਅਤੇ ਸਥਿਰਤਾ ਰਣਨੀਤੀਆਂ; ਇੱਕ ਸਮੀਖਿਆ। ਹੇਲੀਓਨ 9, e13156 (2023)।